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 摘要：槲皮素，又名櫟精，槲皮黃素，溶于冰醋酸，堿性水溶液呈黃色，幾乎不溶于水，乙醇溶液味很苦。可作為藥品，具有較好的祛痰、止咳作用，并有一定的平喘作用。

      目的建立余甘子藥材中槲皮素含量測定的方法。方法HPLC法測定槲皮素含量。色譜柱為SHIMADZUVP-ODS（5μm，250mm×4.6mm），保護柱為大連中匯達C18，流動相：甲醇-0.4％磷酸溶液（含2.4g·L-1庚烷磺酸鈉）（50∶50），流速1.0ml·min-1，檢測波長373nm。結果進樣量在0.02～0.20μg范圍內與色譜峰的峰面積呈良好的線性關系（r=0.9997），余甘子藥材平均加樣回收率為97.3%，RSD為0.99%（n=6）。結論該方法操作簡便、快速，有良好的精密度和準確性，可用于余甘子藥材的質量控制。

      「關鍵詞」余甘子；槲皮素；液相色譜法AbstractObjectiveToestablishamethodfordeterminationofthecontentofquercetininPhyllanthusemblicaL..MethodsQuercetinwasquantitativelydeterminedbyhighperformanceliquidchromagraphy（HPLC）。WithSHIMADZUVP-ODS（5μm，4.6mm×250mm）column，amixtureofmethanoland0.4％H3PO4（with2.4g·L-1C7H15SO3Na）（50∶50）wasusedasphase，theflowratewas1ml·min-1andUVdetectionwavelengthwasat373nm。ResultsThelinearrelationshipwasgoodwithintherangeof0.02～0.20μg（r=0.9997）。TheaveragerecoveryofChinesemedicinalplantPhyllanthuswas97.3%andtherelativestandarddeviationwasbelow0.99%（n=6）。ConclusionThemethodisfast，simple，accurateandreproducibleandcanbeusedforthequalitycontrolofPhyllanthusemblicaL.KeywordsPhyllanthusemblicaL.；Quercetin；HPLC余甘子為大戟科葉下珠屬（Phyllanthus）植物余甘子PhyllanthusemblicaL.的干燥成熟果實。《云南省藥品標準》《藏藥標準》《中國藥典》均收載。別稱滇橄欖、橄欖、油甘子、望果；藏藥稱“久如拉”，傣藥稱“麻項幫”；古印度梵語稱“庵摩勒”。在云南地區常作橄欖使用，還是藏族習用藥材。味酸、甘、澀，主要用于治療胃痛、腸炎、黃疸型肝炎、淋巴結核、高血壓病等。研究表明余甘子具有抗氧化、抗癌、抗病毒、降血脂等作用［1］。余甘子主要含沒食子酸（Gallicacid）；鞣花酸（Ellagicacid）；1-O-沒食子酰基-β-D葡萄糖；3，6-二-O-沒食子酰基-D-葡萄糖；訶子酸（Chebulinicacid）；槲皮素（Quercetin）；訶黎勒酸（Chcbtllagicacid）；鞣料云實精（Corilagin）；3-乙基沒食子酸（3-ethoxy-4，5-dihydroxy-benzoicacid）等，其中槲皮素主要以槲皮苷的形式存在。余甘子還含有大量維生素C（1.0%～1.8%），且含量穩定［2］。本實驗采用液相色譜法測定余甘子藥材中槲皮素的含量。

      1儀器與試藥島津LC-20AT液相色譜儀、SPD-20A紫外檢測器、CBM-102色譜數據處理機；槲皮素對照品由中國藥品生物制品檢定所提供，甲醇、庚烷磺酸鈉為色譜純，其它試劑均為分析純，水為純凈水。

      余甘子藥材產地為云南省新平縣平甸鄉，春季采收干燥。經作者鑒定為大戟科葉下珠屬植物余甘子PhyllanthusemblicaL.的果實。

      2方法與結果2.1色譜條件SHIMADZUVP-ODS（5μm，250mm×4.6mm）色譜柱，大連中匯達C18保護柱，甲醇-0.4％磷酸溶液（含2.4g·L-1庚烷磺酸鈉）（50∶50），流速1.0ml·min-1；柱箱溫度35℃，紫外檢測波長373nm，在上述條件下，樣品中槲皮素與其它峰分離度大于2.0，理論塔板數達10000以上，槲皮素峰拖尾因子在1.05～1.18之間，且樣品中其它組分色譜峰無干擾，見圖1。

      2.2對照品溶液的制備取槲皮素對照品適量，精密稱定，用甲醇溶解，制成含槲皮素0.010mg·ml-1的對照品溶液。

      2.3供試品溶液制備取余甘子粉末（過40目篩）約5g，精密稱定，加入250ml甲醇，加熱回流1.5h，回收甲醇，殘渣精密加入甲醇-5%鹽酸溶液（4∶1）的混合液25ml，稱定重量，加熱回流30min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，過0.45μm濾膜［3，4］，即得。

      2.4標準曲線與線性范圍精密吸取槲皮素對照品溶液2，4，6，10，14，20μl進樣測定，按上述色譜條件測定峰面積，以峰面積為縱坐標，進樣質量數（μg）為橫坐標，進行線性回歸計算，得回歸方程：Y=53819X-45028（r=0.9997），在0.02～0.20μg范圍內槲皮素有良好的線性關系。

      2.5精密度實驗精密吸取槲皮素對照品溶液10μl，連續進樣6次，記錄色譜圖，槲皮素保留時間tR=15.512，其峰面積相對標準偏差RSD值為0.97%（n=6）。

      2.6重復性實驗分別取同一批余甘子藥材按“2.3”項下方法制備供試品溶液5份，進樣，記錄色譜圖，計算結果，藥材中槲皮素含量的平均值為0.563g，RSD值為0.89％。

      2.7供試品溶液的穩定性實驗取同一份余甘子藥材供試品溶液，室溫下，分別于0，2，6，10，14，18，24h，進樣7次，記錄色譜圖，其峰面積相對標準偏差RSD值為1.07%（n=7）。實驗結果表明供試品溶液在24h內穩定。

      2.8加樣回收率實驗取已知含量的余甘子粉末6份，每份5g，精密稱定，分別精密加入槲皮索對照品溶液（0.010mg/ml）16ml，按“2.3”項下方法制備供試品溶液，在上述色譜條件下進樣10μl，記錄色譜圖，結果余甘子的加樣回收率為97.3%，RSD值為0.99%（n=6）。結果見表1。表1槲皮素加樣回收率結果（略）

      2.9樣品的測定稱取余甘子藥材5g，按“2.3”項下方法制備供試品溶液，在上述色譜條件下分別進樣10μl，作者采收的云南省新平縣的余甘子藥材中槲皮素含量為0.056mg·g-1（n=2），成都荷花池藥材市場購買的川產余甘子藥材中槲皮素含量為0.086mg·g-1（n=2）。結果見表2。

      3討論3.1流動相的考察曾考察過甲醇－水-磷酸（50∶50∶0.2）［5］，乙腈-水（36∶64），（40∶60），乙腈-0.4%磷酸（55∶45），（50∶50），（36∶64），甲醇－0.4%磷酸（40∶60），（45∶55），（50∶50）［3］。以甲醇-0.4%磷酸（50∶50）系統對待測成分的分離效果較好。且加入庚烷磺酸鈉在甲醇-0.4%磷酸（50∶50）系統下以每升流動相內含1.2g時對峰形的改善效果達到*值。表2余甘子中槲皮素含量測定結果（略）

      3.2檢測波長的確定在190～500nm波長范圍內進行紫外檢測，槲皮素在373nm波長處有zui大吸收，在此波長處供試液中槲皮素與其他組分色譜峰得到較好分離。

      3.3樣品測定前的處理余甘子粉末極易吸濕，稱量前可在60℃下干燥，經比較槲皮素未損失。《中國藥典》2005年版對余甘子藥材去核與否未作規定，實驗所用的荷花池所售余甘子為去核的，而云南采集的余甘子并未做去核處理，結果顯示四川產余甘子比云南產余甘子所測槲皮素含量高近1.5倍，且在槲皮素峰后多一小峰，可能與余甘子果核與余甘子果肉中槲皮素含量和化學成分組成的差異有關。

      本實驗采用液相色譜法對余甘子中槲皮素的含量進行測定，具有快速、簡便、良好的精密度和準確性等優點，適用于余甘子藥材的質量控制。